***绿两种染料，直观了解并把握自在流电泳别离室中稳流的树立及别离纯化蛋白质的基本原理。

  自在流电泳（FFE）是一种接连性的兼具样品制备和剖析功用的纯液相电泳技术。它具有试验条件温文、处理样品大、别离功率高级长处。一个典型的自在流电泳装置由两块相隔十分近的平行板组成，然后构成一个极薄的别离室。样品和布景缓冲液被恒流泵从别离室的进样口端接连引进别离室，当样品进入别离室今后，被布景缓冲液流带动流向出口端；一起在与液体活动方向笔直的方向上施加一电场，因为样品中各组分所带电荷数及分子质量不同，然后以不同速度做横向移动，因而具有不一样电泳搬迁率的物质将在电场中搬迁不同的间隔，然后在别离室出口端的不同出口处得到搜集。

  样品与中垂线所构成的视点巨细则由进样速度、布景缓冲液活动速度、样品所带电荷的正负和巨细、样品相对分子质量的巨细几部分决议。

  ：小型自在流电泳仪，包含FFE别离室（FFE别离的关键设备）、多道恒流泵、恒流泵、600V电泳电源和搜集设备等。

  ，将超纯水泵入别离室，当超纯水刚进入别离室时，应将别离室出口端轻轻抬起，调低流速，使超纯水缓慢并均匀进入别离室，然后将气泡从别离室排出。当气泡彻底排出后，持续泵入超纯水冲刷1min，再替换Tris-HCl缓冲液。

  ，用多道恒流泵把缓冲液和样品泵到别离室中，经过限速阀操控样品的流量，一起依据别离室的巨细，挑选正真合适的布景缓冲液流速。

  ***绿、结晶紫染料样品进样，调查别离室流形是否安稳，是否歪曲变形。如存在这样一些问题，查看气泡是否扫除，别离室密封性是否无缺，调整直到可以构成安稳的流形。用相机或手机摄影成像。

  ，将电极室中电极接通600V电泳电源，调整电压至300V开端做样品的别离。如别离室安稳，则可以直接调查到安稳的染料的流形。用相机或手机摄影成像。

  由图中可以精确的看出，样品分为两条较显着的条带，且别离进入了不同的搜集管，其间紫色条带为结晶紫，蓝绿色条带为***绿。还可以精确的看出蓝绿色条带与中垂线构成的视点大于紫色条带的，因而能得出***绿所带的电荷比结晶紫多，一起两条色带一起向一边流去，因而两种染料的电荷正负性相同。